Диагностика гематологических заболеваний начинается в лаборатории. Врач-лаборант оценивает морфологическую картину крови и выставляет диагноз. Гематологам-морфологам хорошо известно, что правильная и качественная окраска мазков крови и костного мозга имеет большое значение для точной оценки изменений морфологии клеток. В связи с этим качественные препараты периферической крови и костного мозга играют важную роль в диагностике и контроле лечения гематологических заболеваний. В 1997 г. Санкт-Петербургская научно-производственная фирма (НПФ) "Абрис+" наладила производство красителей для гематологии серии Диахим-ГемиСтейн. Критерии, по которым определяется качество окраски известны:
- Окраска гемоглобина эритроцитов розовая;
- Зернистость нейтрофилов хорошо прокрашивается (т.е. фиолетовое окрашивание на розовом фоне);
- Выявляется нежная азурофильная зернистость моноцитов;
- Ядра лейкоцитов фиолетово-красного цвета с хорошо видимой структурой хроматина;
- Хорошо выделяются ядрышки;
- Цитоплазма нейтрофилов светло-розовая.
Именно эти параметры качества окраски мазков периферической крови, костного мозга и др. биопрепаратов, были заданы при создании красителей серии "Диахим-Гемистейн", включившие в свой состав: красители-фиксаторы по Май-Грюнвальду, типа Лейшмана, а также краситель по Романовскому двух квалификаций: "профессионал", предназначенный для окраски периферической крови, костного мозга, различных биоматериалов, для докрашивания хромосом и т.д., и "классик", предназначенный для окраски периферической крови. Представленные красители были испытаны на кафедре клинической лабораторной диагностики Санкт-Петербургской медицинской академии последипломного образования, в лабораториях Клинического центра передовых медицинских технологий, Санкт-Петербургского государственного университета им. И. П. Павлова и в НИИ гематологии и трансфузиологии РАМН. Окрашивались препараты следующих биоматериалов: периферической крови, костного мозга, пунктатов лимфатических узлов, ликвора и выпотных жидкостей. Для разведения красок и смывания их рекомендуется использовать смесь для приготовления буферного раствора, предлагаемую нашей фирмой, с рН 6,8-7,2. Результатом проделанной работы явились следующие выводы:
- Наилучшим способом окраски препаратов периферической крови и костного мозга, а также лимфатических узлов красителями серии "Диахим-Гемистейн", производства фирмы "Абрис+" можно считать метод Паппенгейма-Крюкова, а именно: комбинированная окраска фиксатором-красителем по Май-Грюнвальду и красителем Романовского. Рекомендуется погружать мазки в фиксатор и выдерживать в течение 2 минут. В качестве фиксатора можно использовать и фиксатор-краситель типа Лейшмана в течение 3 минут. Последующую докраску производить раствором красителя по Романовскому производства нашей фирмы.
- Ценным качеством красителей фирмы "Абрис+" является возможность использовать фиксатор-краситель по Май-Грюнвальду в качестве фиксатора и для последующего докрашивания мазков. Данный краситель был успешно использован и для окраски мазков крови и костного мозга в аппарате "НЕМА ТЕК" фирмы "Bayer" вместо стандартной краски, предлагаемой в наборах к названному аппарату.
- Разные биоматериалы требуют своего режима окраски. Так для окраски выпотных жидкостей лучшим, по нашему мнению является фиксатор по Май-Грюнвальду, причем фиксация длится не более 1 минуты, с последующей окраской красителем по Романовскому в разведении 1:10 и даже 1:15 в течение 3 мин.
Обращаем ваше внимание на то, что каждая новая партия красителя требует отработки своего режима окраски, даже если они применяются для одного и того же биоматериала. Препараты костного мозга и лимфатических узлов требуют индивидуального подхода к режиму окраски в зависимости от клеточности материала.
|